
ELISA样本制备指南及注意事项
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定义及介绍
ELISA(enzyme linked immunosorbent assay,酶联免疫吸附测定)是最基础的免疫学实验之一,其理论基础是的特异性反应。ELISA因其特异性强、灵敏度高、稳定性好而被广泛使用。ELISA试剂盒检测样品包括血清、血浆、细胞培养上清、灌洗液或尿液等生物样本,实验操作步骤并不繁琐,但实验完成后需要把样本检测结果OD值转化为浓度值,从而供下一步分析所用,因此样品的预处理对于后续数据处理和结果分析非常重要。
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样本制备指南
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血清
全血样品于室温放置2小时或2-8℃过夜后于2-8℃,1000×g离心20min,取上清即可检测。收集血液的试管应为一次性的无内毒素试管。避免使用溶血,高血脂样品
2.血浆
不匹配而出现不能检测的情况。
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对于组织匀浆、组织全蛋白、细胞提取液等蛋白提取样本,经BCA法测定样本蛋白含量后,建议进行蛋白浓度的统一化,避免因组织重量、细胞数、产物体积等因素造成的人为误差;例如,统一全部检测样本浓度为1-2mg/mL,进行后续的稀释和检测。
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【环球网综合报道】据英国《每日邮报》5月8日报道,一项新的研究表明,通过体外受精(IVF)和其他方法出生的婴儿发育正常,不会出现发育迟缓现象。
此前有研究认为,通过体外受精等辅助生育技术(ART)出生的婴儿更容易早产或出生时体重偏低,这使得一些希望通过这一技术受孕的父母担心孩子会“不正常”。
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然而,由伊利诺伊州生育中心与拉什大学合作进行一项新的研究会消除了上述忧虑,且证明通过辅助生育技术出生的婴儿与自然生育的婴儿在重要阶段的发育情况没有差别。研究第一作者、伊利诺伊州生育中心的产科医生、妇科医生珍妮弗希什菲尔德齐特龙博士说:“由于担心孩子出生后‘不正常’,许多父母不会接受生育治疗。而这项研究有助于消除这一忧虑。”
已有研究表明辅助生育技术不会影响儿童的身心发展。然而,研究人员一直热衷于站在父母的角度看待这一问题。希什菲尔德博士表示:“父母花很多时间陪伴孩子,比任何人都更了解孩子的行为,因此,从父母的角度分析儿童的发展非常重要。”
研究人员通过移动应用程序对1881位家长进行了调查,调查他们的孩子在发育标志阶段的发育情况。受调查的人中有229人(12.2%)通过辅助生育技术进行生育,其中78位使用了体外受精,91位服用了治疗不孕的药物,89位接受了宫内人工授精(即将精子置于子宫内),28位尝试了多种方法。其余1652人为自然怀孕生产。调查结果显示,无论是自然生育的儿童还是通过辅助生育技术出生的儿童,他们在不同发育标志阶段的表现相同。
儿童的发育标志由美国疾病控制和预防中心规定,其中包括:儿童两个月时应开始微笑,一岁时应在没有帮助时下坐下,五岁时能够说出完整的句子。两个月大的儿童的发育标志可能是发出“喔”、“啊”等声音、眼睛可以随着物品移动或抬起头。
该研究还发现,通过辅助生育技术出生的婴儿比自然怀孕后出生的婴儿在一岁时甚至达到了更多的发育标志,前者中拥有约四个发育标志的占90.6%,而后者仅有82.9%。
研究结果全文在美国加利福尼亚州举行的太平洋海岸辅助生殖技术学会年会上公布。(实习编译:潘婷 审稿:谭利娅)
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